Quelle cuvette devriez-vous utiliser ? Micro-Volume vs Macro-Volume, VIS vs UV, Verre vs Plastique
This post is also available in:
Nederlands (Néerlandais) 
English (Anglais) 
polski (Polonais) 
Español (Espagnol)
La solution doit être placée dans un format spécifié dans le trajet lumineux d’un photomètre pour les examens photométriques d’échantillons liquides. Le choix typique pour cette application est les cuvettes, qui sont des conteneurs d’échantillons avec des fenêtres optiques.
Source de l’image : photo scientifique/shutterstock.com
La solution doit être placée dans un format spécifié dans le trajet lumineux d’un photomètre pour les examens photométriques d’échantillons liquides. Le choix typique pour cette application est les cuvettes, qui sont des conteneurs d’échantillons avec des fenêtres optiques. L’espacement entre les fenêtres optiques est spécifié avec précision, ce qui permet de déterminer la longueur du trajet de l’échantillon à l’intérieur de la cuvette. Même si seules les cuvettes utilisées pour les mesures d’absorbance dans le domaine de la spectroscopie UV-Vis sont examinées, la sélection de différents types de cuvettes est vaste. La cuvette carrée est la plus courante, ayant des dimensions extérieures de 12,5 x 12,5 mm. Des quantités d’échantillons allant des microlitres (ultra-micro cuvettes) aux millilitres (macro cuvettes) sont prises en charge dans ce format.
La longueur de trajet typique d’une cuvette est de 10 mm, mais il existe également des cuvettes qui donnent un trajet lumineux plus court à travers l’échantillon. De plus, les cuvettes diffèrent en termes de matériau, de hauteur et de taille de la fenêtre de mesure.
Types of Quartz Cuvettes and Cells
Cuvettes avec des dimensions extérieures standard de 12,5 x 12,5 mm mais des exigences de volume minimum d’échantillon variées.
Le type de cuvette à choisir sera déterminé par l’instrument utilisé, la nature de l’application et les caractéristiques de l’échantillon. Il est essentiel que les cuvettes soient aussi transparentes que possible pour les longueurs d’onde mesurées afin que la plage linéaire du photomètre ne soit pas limitée.
Étant donné que la cuvette doit être compatible avec l’appareil, la sélection de l’équipement nécessite des exigences sur la cuvette. Cela fait principalement référence aux dimensions extérieures de la cuvette, car elle doit s’insérer dans le puits de la cuvette, bien que la hauteur des fenêtres de mesure soit également importante. Ceux-ci doivent être exactement alignés avec le chemin de la lumière qui traverse l’instrument. Cela est particulièrement vrai pour les cuvettes qui sont destinées à mesurer de petites quantités et, par conséquent, ont des fenêtres de mesure extrêmement étroites. Les hauteurs de trajet lumineux les plus courantes sont de 8,5 mm et 15 mm.
Les longueurs d’onde de mesure impliquées dans l’application en question sont le prochain facteur crucial à prendre en compte. Les cuves en PMMA, polystyrène et verre ordinaire sont exclusivement transparentes dans le visible. Des cuvettes en verre de quartz ou un type spécifique de plastique qui donnent une transparence suffisante dans cette plage doivent être utilisées si des longueurs d’onde dans la région UV, inférieures à environ 300 nm, sont utilisées.
Différences dans les spectres d’absorbance des cuvettes construites avec divers matériaux mesurés entre 220 nm et 400 nm
Pour les méthodes qui reposent sur des réactions qui se produisent à une température donnée et quantifient l’absorbance dans le temps, le chauffage et le contrôle efficace de la température d’un échantillon pendant le processus de mesure sont essentiels. Dans ce cas, il est essentiel que la zone de contact entre la paroi de la cuvette et l’arbre de la cuvette à température contrôlée soit aussi large que possible, en plus du degré de résistance approprié du matériau. Certaines cuvettes, telles que les macro-cuvettes, présentent un avantage dans les applications à température contrôlée en raison de ces facteurs.
La nature, la quantité et la concentration du matériau à portée de main sont tous des facteurs qui auront un impact sur la sélection de la cuvette. Le matériau à partir duquel la cuvette est construite est largement insignifiant si l’échantillon est basé sur une solution aqueuse. Les cuves en verre, en revanche, sont recommandées lorsque des solvants organiques sont impliqués car elles ont une résistance plus forte que les cuves en plastique.
Si une petite quantité d’échantillon est disponible, il peut être utile d’envisager de le réutiliser pour d’autres mesures. Des cuvettes en plastique à usage unique sont conseillées dans cette situation. Des cuvettes en plastique emballées individuellement avec le degré de pureté approprié réduiront les risques de contamination. Des cuvettes, qui ont été conçues pour contenir des quantités extrêmement infimes, peuvent également être utilisées.
Étant donné que chaque instrument a une limite de détection, la concentration d’un échantillon aura également un impact sur la sélection de la cuvette. L’ADN double brin peut être mesuré avec succès jusqu’à une concentration maximale de 100 g/ml à l’aide d’un photomètre avec une plage de mesure linéaire allant jusqu’à 2 A et une longueur de trajet de 10 mm. Les solutions à concentration plus élevée doivent être diluées, ou la dilution peut être imitée en utilisant une cuvette avec une longueur de trajet plus courte. Une longueur de trajet de 1 mm, selon l’équation de Lambert-Beer, permet des mesures de concentrations d’ADNdb aussi élevées que 1 000 g/mL.
Si la nature de l’application ne dicte pas le contraire, le matériau de la cuvette est une autre option à considérer. Les cuvettes en verre, en général, offrent une transparence et une précision de mesure supérieures, et elles peuvent être réutilisées plusieurs fois. Les cuvettes en plastique, en revanche, sont faciles et sûres à manipuler. Étant donné que les cuvettes en plastique ne sont utilisées qu’une seule fois et n’ont pas besoin d’être nettoyées, les dommages et les pertes potentiels ne sont pas un problème.
